La stérilisation des explants est une étape clé dans tout travail de culture de tissus végétaux, car l’élimination de tous les micro-organismes, y compris les bactéries et les champignons, est essentielle pour réussir l’initiation, la croissance et le développement des tissus cultivés in vitro, qui autrement seraient submergés par le contaminants [2].
Qu’est-ce qu’un agent stérilisant de surface ?
L’hypochlorite de sodium, généralement acheté comme eau de Javel, est le choix le plus fréquent pour la stérilisation des surfaces. Il est généralement dilué à 10 % – 20 % de la concentration d’origine, ce qui donne une concentration finale de 0,5 – 1,0 % d’hypchlorite de sodium. Le matériel végétal est généralement immergé dans cette solution pendant 10 à 20 minutes.
Quel est le principe de la stérilisation de surface ?
Principe : La stérilisation est réalisée par chaleur sèche à haute température. Les cellules bactériennes et les spores meurent en raison de la déshydratation.
Comment stérilisez-vous la culture de tissus végétaux?
Les milieux de culture de tissus végétaux sont généralement stérilisés par autoclavage à 121 °C et 1,05 kg/cm2 (15-20 psi). Le temps requis pour la stérilisation dépend du volume de milieu dans le récipient.
Pourquoi le processus de stérilisation des médias a-t-il lieu dans la culture tissulaire ?
Les milieux de culture cellulaire sont un élément clé du biotraitement en amont nécessaire pour favoriser la croissance et la survie des cellules. Ceci est essentiel pour obtenir une densité cellulaire viable et, en fin de compte, le titre de produit souhaité.
Pourquoi la stérilisation des supports de culture est-elle importante ?
Il détruira les champignons, les bactéries, les nématodes, les insectes et la plupart des mauvaises herbes. Son efficacité est évaluée simplement en mesurant la température du milieu et la durée du temps de contact.
Quels sont les deux avantages de la culture tissulaire ?
Avantages de la culture tissulaireLes nouvelles plantules peuvent être cultivées en peu de temps. Seule une petite quantité de tissu végétal initial est nécessaire. Les nouvelles plantules et plantes sont plus susceptibles d’être exemptes de virus et de maladies. Le processus ne dépend pas des saisons et peut être effectué tout au long de l’année.
Quels sont les 3 types de stérilisation ?
Trois méthodes principales de stérilisation médicale se produisent à partir de processus à haute température/pression et chimiques.
Stérilisateurs à gaz plasma.
Autoclaves.
Stérilisateurs au peroxyde d’hydrogène vaporisé.
Quelles sont les 4 méthodes de stérilisation ?
La stérilisation peut être obtenue par une combinaison de chaleur, de produits chimiques, d’irradiation, de haute pression et de filtration comme la vapeur sous pression, la chaleur sèche, le rayonnement ultraviolet, les stérilisants à la vapeur de gaz, le dioxyde de chlore, etc.
À quoi sert le processus de stérilisation du filtre utilisé dans la culture de tissus végétaux ?
Utilisations de la stérilisation par filtre Il est utilisé pour stériliser les substances de croissance thermolabiles telles que la zéatine, l’acide gibbérellique (GA3), l’acide abscissique (ABA), l’urée et certaines vitamines. La stérilisation de ces produits chimiques se fait en utilisant des filtres de taille de pores 0,22 –0,45 µ.
Quelle est l’importance de la stérilisation?
Sécurité. La principale raison pour laquelle la stérilisation est importante est la manière dont elle empêche la propagation potentielle de bactéries nocives et d’autres agents pathogènes susceptibles de provoquer des maladies.
Quelle est la meilleure méthode de stérilisation du milieu nutritif ?
Bien que la stérilisation des milieux de culture soit mieux effectuée dans un autoclave à vapeur à des températures comprises entre 121 et 134°C, il faut reconnaître que des dommages sont causés au milieu par le processus de chauffage.
Qu’entendez-vous par stérilisation ?
La stérilisation fait référence à tout processus qui élimine, tue ou désactive toutes les formes de vie (en particulier les micro-organismes tels que les champignons, les bactéries, les spores, les organismes eucaryotes unicellulaires tels que Plasmodium, etc.) et d’autres agents biologiques tels que les prions présents dans un environnement spécifique. surface, objet ou fluide, pour
Est-il utilisé comme agent de stérilisation de surface ?
Hypochlorite de sodium : Il est communément appelé eau de Javel. C’est le choix le plus fréquent pour la stérilisation de surface des explants. L’eau de javel commerciale contient 5,25 % d’hypochlorite de sodium. Hypochlorite de calcium : Il est disponible dans le commerce sous forme de poudre et avant de l’utiliser pour la stérilisation, il doit être dissous dans de l’eau.
Qu’est-ce que la stérilisation de la surface des graines ?
Les graines sont stérilisées en surface avec une solution d’eau de Javel (30 % d’eau de Javel commerciale + 0,02 % de Triton X-100) pendant 15 min, lavées 3 fois avec de l’eau stérile et placées à 4 °C pendant la nuit avant le placage. Modifications spécifiques à l’espèce : Après le placage, les bulbilles peuvent prendre 2 à 3 semaines pour germer et 1 à 2 semaines supplémentaires pour développer des racines.
Comment stérilisez-vous les explants ?
Stérilisation de la capsule verte
Faire tremper la capsule dans une solution d’eau de Javel à 100 % pendant 30 minutes.
Trempez la capsule dans de l’alcool à 95 % et flambez.
Dans des conditions aseptiques, ouvrir la capsule et gratter la graine.
Couche soigneusement la graine sur la surface du milieu de culture.
Quelle est la meilleure méthode de stérilisation ?
La méthode de stérilisation en laboratoire de choix dans la plupart des laboratoires est l’autoclavage : utiliser de la vapeur sous pression pour chauffer le matériel à stériliser. Il s’agit d’une méthode très efficace qui tue tous les microbes, spores et virus, bien que, pour certains insectes spécifiques, des températures ou des temps d’incubation particulièrement élevés soient nécessaires.
Quelles sont les 5 méthodes de stérilisation ?
Top 5 des méthodes utilisées pour la stérilisation | Microbiologie
Méthode # 1. Stérilisation à la chaleur humide :
Méthode # 2. Stérilisation à la chaleur sèche :
Méthode # 3. Stérilisation au gaz :
Méthode # 4. Stérilisation par rayonnement :
Méthode # 5. Stérilisation par Filtration :
Est-ce la méthode de stérilisation la plus courante ?
Lors de l’utilisation de la vapeur, les substances à stériliser sont soumises à la vapeur dans un équipement de chauffage à la vapeur en autoclave. Le processus utilise des températures allant jusqu’à 115 degrés pendant une heure. C’est la méthode la plus courante pour stériliser les médicaments car elle peut tuer les spores bactériennes, qui sont des formes bactériennes inertes.
Pourquoi autoclave-t-on à 121 degrés Celsius ?
Température. La température standard pour un autoclave est de 121 degrés Celsius. La raison en est que le simple fait d’amener quelque chose à la température de l’eau bouillante, 100 degrés Celsius (212 degrés Fahrenheit), n’est pas suffisant pour le stériliser car les spores bactériennes peuvent survivre à cette température.
Quelle est la différence entre la stérilisation et la désinfection ?
La stérilisation décrit un processus qui détruit ou élimine toutes les formes de vie microbienne et est effectué dans les établissements de santé par des méthodes physiques ou chimiques. La désinfection décrit un processus qui élimine de nombreux ou tous les micro-organismes pathogènes, à l’exception des spores bactériennes, sur des objets inanimés (tableaux 1 et 2).
L’autoclavage est-il une forme de stérilisation ?
La stérilisation en autoclave fonctionne en utilisant la chaleur pour tuer les micro-organismes tels que les bactéries et les spores. Selon les directives des Centers for Disease Control (CDC) pour la désinfection et la stérilisation des é